上篇文章簡單介紹了制作切片的簡單方法。工業(yè)視頻顯微鏡將傳統(tǒng)的顯微鏡與攝像系統(tǒng),顯示器或者電腦相結(jié)合,達(dá)到對被測物體的放大觀察的目的。金相顯微鏡電腦型金相顯微鏡或是數(shù)碼金相顯微鏡是將光學(xué)顯微鏡技術(shù)、光電轉(zhuǎn)換技術(shù)、計(jì)算機(jī)圖像處理技術(shù)**地結(jié)合在一起而開發(fā)研制成的高科技產(chǎn)品，可以在計(jì)算機(jī)上很方便地觀察金相圖像，從而對金相圖譜進(jìn)行分析，評級等以及對圖片進(jìn)行輸出、打印。體視顯微鏡指從不同角度觀察物體,使雙眼引起立體感覺的雙目顯微鏡。本文詳細(xì)介紹了專業(yè)切片的制作方法。

體視顯微鏡切片技術(shù)制作教學(xué)方法：

材料分為分、固、洗、脫水、透明、浸蠟、嵌蠟、切片、膠合、脫蠟、染色、脫水、透明、密封

1 、固定液

( 1 )FAA ：福爾馬林一冰醋酸一酒精

90毫升+50%或70%乙醇+5毫升冰醋酸+5毫升福爾馬林(37%-40%甲醛)

固定工作時(shí)間*短需10h，一般通過不低于24h，可兼做保存液

在年輕材料中使用50%的酒精代替70%的酒精可以防止收縮。 如果材料較硬，稍微減少冰乙酸，稍微增加甲醛，如果材料容易收縮，稍微增加冰乙酸。 加入5ml甘油以防止材料蒸發(fā)和硬化。 如果用于植物胚胎材料，使用以下配方以獲得更好的效果：

50% 乙醇89ML + 乙酸6ML + 福爾馬林(37% -40% 甲醛)5mL

( 2 ）卡諾氏固定液：酒精一醋酞一氯仿

配方1: 純酒精3冰醋酸1(3:1)

配方2：純酒精6冰醋酸1+氯仿3（或純酒精30mL+氯仿5mL+冰醋酸10mL），一般材料不超過24h，固定根尖和花藥僅需40-60min。 固定后用95%乙醇（85%乙醇）沖洗20min，如不立即處理，轉(zhuǎn)移至70%乙醇中保存。

2.洗滌:FAA固定液不經(jīng)洗滌直接脫水。

3 、脫水：材料中不同含水，水與石蠟組織不能通過混合，通常由50％、70％、80％、90％、無水就是乙醇，每次1h ，其中一個(gè)無水乙醉需2次。材料大的需延長使用脫水處理時(shí)間（一般企業(yè)此后中國預(yù)染色）

透明：常見的透明劑是二甲苯和氯仿。 首先與乙醇和二甲苯(1/2乙醇+1/2二甲苯)混合，然后純二甲苯(2次)，每次1-2h。

三氯甲烷染色后不能透明。1/5氯仿(4/5無水乙醇)→2/5→3/5→4/5，每品位純氯仿(2次)3-4小時(shí)，在*后純氯仿中，放入純石蠟粉多次，蓋上瓶蓋，36 °C 培養(yǎng)箱36小時(shí)，將物料慢慢浸蠟。

5 、浸蠟、包埋：石蠟必須得到純凈、不含任何雜質(zhì)；浸蠟是使石蠟開始逐漸發(fā)展取代透明劑

石蠟：熔點(diǎn)52-56 ℃，一般為50-60 ℃

選擇可與乙醇和石蠟混溶的有機(jī)溶劑，如二甲苯，溫度箱設(shè)置為比石蠟在2 ℃ 的熔點(diǎn)高25%→ 50%→ 75%（石蠟、二甲苯溶液）。

待物料透明后，換上新的二甲苯，然后加入等體積的碎蠟，繼續(xù)加入碎蠟至40℃飽和，然后保持升溫3-5h，期間換3次純蠟，每次約1-2h。